俗話說，“豬糧安天下”，生豬產(chǎn)業(yè)是關(guān)系國計(jì)民生的重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)。經(jīng)過一年的努力，目前我國非洲豬瘟疫情勢(shì)頭總體減緩，養(yǎng)豬場(chǎng)戶信心逐步增強(qiáng)，接下來將以非洲豬瘟疫情防控和恢復(fù)生豬生產(chǎn)為重點(diǎn)任務(wù)。而在非洲豬瘟疫情防控、非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的過程中，低速離心機(jī)等檢測(cè)儀器設(shè)備將受到高度的關(guān)注。
在低速離心機(jī)的使用過程中，如何正確操作是關(guān)鍵。對(duì)此，上海盧湘儀對(duì)檢驗(yàn)新型非洲豬瘟的操作步驟，包括檢測(cè)前準(zhǔn)備工作、實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材、新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀樣本處理及要求、新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀操作步驟進(jìn)行了解答。
檢測(cè)前準(zhǔn)備工作
1、請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀試劑盒，平衡至室溫。
2、從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶完全溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃。
3、需要做20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材
1.新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀(450nm)
1.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.準(zhǔn)備37℃恒溫箱或水浴鍋
4.蒸餾水或去離子水
新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀樣本處理及要求
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3.新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5.新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各50μL。
3.待測(cè)樣本孔加待測(cè)樣本10μL，樣本稀釋液40μL。
4.隨后陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光水浴鍋孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在新型非洲豬瘟檢驗(yàn)儀450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
作為在美國獲得FDA認(rèn)證的中國離心機(jī)企業(yè)，上海盧湘儀目前已經(jīng)通過了ISO9001：2015質(zhì)量體系認(rèn)證和ISO13485：2003質(zhì)量體系認(rèn)證以及CE認(rèn)證，企業(yè)從設(shè)備的生產(chǎn)制造、銷售、到售后服務(wù)形了完整體系，旗下離心機(jī)產(chǎn)品更是出口到美國、德國、英國、加拿大、泰國等30多個(gè)國家。“不斷創(chuàng)新，面向未來”是盧湘儀追求的目標(biāo)，企業(yè)將竭盡全力，向用戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)，并愿與國內(nèi)外企業(yè)建立廣泛的技術(shù)合作關(guān)系！
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