目前，制藥行業(yè)關于注射用水（Water for Injection，WFI）較為普遍接受的微生物限度是10 CFU/100 ml，實際上，在藥典注射用水的發(fā)展歷史上，這并不一直是WFI的限度。使用10 CFU/100 ml限制可能早于對水系統(tǒng)中生物膜的認識，并且隨著時間的推移而發(fā)展。在USP XXI(1985)中，USP的基本信息章節(jié)"藥物用途水"<1231>中添加了"成分水的微生物控制行動指南"一節(jié)，其中純化水的和注射用水的"可接受的總微生物數(shù)量"分別為100CFU/ml和50CFU/ml。該部分也第一次表示，第61章中的USP微生物限度測試不是專門設計用以測試藥典水的，而且每家公司都應該開發(fā)出合適的藥典水測試程序，這一說法目前仍然準確。然而，值得注意的是，在USP的材料專論中指定的1000以下的所有章節(jié)都是強制性的，而1000以上的所有章節(jié)都是指南和非強制性的。這使得這些在<1231>中發(fā)現(xiàn)的微生物數(shù)值和陳述僅僅是建議性的。純化水或注射用水的USP專論從沒有在專題文本中列出這樣的微生物限度數(shù)值，而且這是有目的的。

       在1985年USP修訂版之前，所有USP對<1231>的修訂一直沒有提及建議的微生物水平，盡管大篇幅強調(diào)了對微生物和熱原控制的需求。有趣的是，在USP XXII(1990)和USP23(1995)這兩個USP修訂版本中，第<1231>章載有在"行動指南"中的相同一節(jié)，其中提及了同樣的對于純化水的100 CFU/ml的基本準則，但沒有提及對于注射用水的標準，只有相同的對所需微生物和內(nèi)毒素控制的普通預防措施。直到USP23的補充5(1996年11月15日正式公布)，當出版了對<1231>的重大修訂時，才將現(xiàn)在熟悉的10 CFU/100 ml建議為"一般認為適當?shù)男袆酉薅?quot;。

       然而，這不是USP第一次使用此微生物數(shù)值，它曾出現(xiàn)在食品和藥物管理局(FDA)的"高純度水系統(tǒng)檢測指南Guide to Inspections of High Purity Water Systems"(FDA，1993)中，其中10 CFU/100 ml被稱為"注射用水的可接受行動極限"。在那個時候，這份指南明確指出，這個水平并不是通過/失敗的明確標準，而是對產(chǎn)品造成影響的任何偏離需要被調(diào)查。

       在1976年的這個時間之前，F(xiàn)DA寫下被稱作"LVP GMP"的文件作為聯(lián)邦法典21 CFR 212(Federal Register，1976)的內(nèi)容，并試圖通過國會批準。這些擬議的規(guī)定中提到了10 CFU/100 ml的限制。為了預防競爭對手，許多企業(yè)開始采用這項擬議法律提出的許多詳細規(guī)則，以期望其最終成為法律。但作為法律文本和詳細要求，嚴格上說它在許多方面存在缺陷和不合理，制藥業(yè)強烈反對此法律中的許多陳述和限制。擬議的"LVP CGMPs"最終被FDA完全撤回，而第212部分小節(jié)從此被重新分配到無關的法律中。然而，早期采用CGMPs第212部分中某些要求的使用者們現(xiàn)在將其中一些未被采納的要求作為企業(yè)內(nèi)控指標。其中存活至今仍較著名的是10 CFU/100 ml的"WFI限制"(非行動限度)和持續(xù)時間超過24小時的冷WFI的"24小時傾倒規(guī)則" (大概是因為能認識到在該時間段內(nèi)發(fā)展的微生物污染的風險)，以及對WFI系統(tǒng)的采樣期望：對系統(tǒng)進行日常采樣和每個采樣點頻率不低于每周采樣。因此，盡管這21項CFR 212要求從未頒布為法律，但它們以現(xiàn)行監(jiān)管預期或cGMP(相對于具有法律約束力的CGMP)的形式成為存活至今的常見行業(yè)慣例。

       從那時起，多年來僅有幾次短暫中斷，10 CFU/100 ml的數(shù)字至今廣泛地被所有藥典用作WFI的"行動水平"或"行動限制"。只有在歐洲藥典中，其WFI專論中的這一數(shù)字被稱為"適當?shù)男袆酉薅?quot;。其他藥典(包括美國藥典)在其各自的非強制性信息章節(jié)中提到這一數(shù)字作為一個行動限度，從藥典的角度提出建議。

       但是，無論何時數(shù)字和測試方法被列入專論，不管其稱謂或命名，他們都是憑借藥典的裁判和通過/失敗的標準(強制程序和在訴訟中的具有法律約束力的限制)。在1993年，美國政府對陣巴爾實驗室的法院裁決創(chuàng)造了OOS調(diào)查(超出標準調(diào)查)的概念，這涉及了產(chǎn)品影響調(diào)查和實驗室產(chǎn)生標準偏差時所需的決策。當FDA發(fā)布了"行業(yè)指導意見：調(diào)查藥品生產(chǎn)OOS測試結(jié)果"時，OOS調(diào)查概念在1998年由此成為官方調(diào)查概念。

       OOS調(diào)查僅適用于通過/失敗標準的偏差(OOS的"S")。然而相反地是，"行動限度"（也可稱作為"糾偏限度"）是一種過程控制術語，旨在應用于過程監(jiān)控數(shù)據(jù)，以檢測過程何時偏離正常操作參數(shù)或范圍。一個行動限度與一個過程有關，而不是一個產(chǎn)品。過程控制措施在報警限度和行動限度方面的的用處是在過程完全失去控制并影響使用水之前發(fā)現(xiàn)異常過程趨勢,例如水系統(tǒng)中的微生物水平。正確設置之后，報警和行動限度會在水達到不適合使用的極限、即其通過/失敗標準失敗之前觸發(fā)反應，以使諸如水系統(tǒng)之類的過程重回控制之下。

       因此，報警和行動限度應有意設定在遠低于預定水的通過/失敗標準的水平。超過行動限度(但不是標準)的確需要進行調(diào)查以找出并糾正原因，但因為尚未超出標準而不會影響產(chǎn)品,水仍適合使用。一旦超出標準，就需要進行OOS調(diào)查(其中包括對產(chǎn)品的影響)。

       制造商面臨的困境是，根據(jù)FDA和其他監(jiān)管機構(gòu)，對于一個WFI樣品，超過此10 CFU/100 ml的數(shù)值就需要OOS調(diào)查(請記住，"S"表示標準)。因此，無論企業(yè)將其稱為行動限度，行動限制或標準，監(jiān)管機構(gòu)認為微生物計數(shù)在10 CFU/100 ml及以上是OOS,換句話說，標準未達到。如果調(diào)查不能明確證明偏差是由實驗室引起的或抽樣誤差，則偏差必須被解釋為實際的標準偏差，并且該水不適合在GMP產(chǎn)品中使用，即使它已經(jīng)被用于那些產(chǎn)品(這是非常有可能的，如果使用常規(guī)的長期培養(yǎng)測試的話)。

       這種默認的法規(guī)解釋非常注重用戶指定的過程控制措施觸發(fā)的適用性，測試實踐的微生物控制以及制造業(yè)用水實踐的衛(wèi)生性質(zhì)(必須完全復制從水系統(tǒng)采樣與使用點時所用的同樣的材料和程序)。因此無論喜歡與否，超過10 CFU/100 ml已經(jīng)演變?yōu)闃藴适〉囊环N說法，可能導致產(chǎn)品被拒絕，重新加工甚至召回。

       繼續(xù)把10 CFU/100 ml稱作WFI的行動限度將否定其作為過程控制工具的價值。超出時，在標準失敗之前控制過程已經(jīng)太晚了，這是標準！正因為如此，在最新版本的USP <1231>(正式出現(xiàn)在2016年12月1日的USP 39-補充2)中，不再錯誤地將這10 CFU/100 ml的數(shù)字作為一個行動限度。本文認為警戒和行動限度應該基于水系統(tǒng)數(shù)據(jù)趨勢，以幫助用戶識別何時水系統(tǒng)可能"漂流"失控，以便可以在其超過水的使用標準之前重新帶回控制中。需進一步指出的是，用戶應根據(jù)自己的水使用情況為自己建立微生物規(guī)范，但是對于WFI，標準不應該高于10 CFU/100 ml。

       參考文獻

       1. 國家藥品食品監(jiān)督管理局，藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂），2010

       2. 國家藥典委員會，中華人民共和國藥典2015年版，中國醫(yī)藥科技出版社，2015

       3. European Pharmacopoeia 9th，2016

       4. U.S. Pharmacopeia National Formulary 41，2017

       5. WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations fourty-sixth Report，Annex 2：WHO Good Manufacturing Practices：Water for Pharmaceutical Use，2012

       6. FDA，Guide to Inspections of High Purity Water Systems，1993

       7. 國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品認證管理中心，中國醫(yī)藥科技出版社，GMP實施指南，2010

       8. 化學工業(yè)出版社，制藥用水系統(tǒng)，2016

       9. 良好自動化生產(chǎn)實踐指南（第五版）

       專家簡介：張功臣，制藥行業(yè)專家，主要從事制藥流體與生物工藝系統(tǒng)的研究與實踐，全國制藥工程設計競賽委員會專家，ISPE培訓專家，國家藥監(jiān)局檢查員培訓專家，國家標準《GB50913-2013 醫(yī)藥工藝用水系統(tǒng)設計規(guī)范》編委。

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